Auf unserer Webseite verwenden wir Cookies, die unter „Cookie-Einstellungen anpassen“ näher beschrieben werden. Notwendige Cookies werden für grundlegende Funktionen der Webseite benötigt, um eine optimale Nutzung zu ermöglichen. Dadurch ist gewährleistet, dass die Webseite einwandfrei funktioniert. Darüber hinaus können Sie Cookies für Statistikzwecke zulassen. Diese ermöglichen es uns, die Webseite stetig zu verbessern und Ihr Nutzererlebnis zu optimieren. Ihre Einwilligung zur Nutzung der Statistik-Cookies ist freiwillig und kann in der Datenschutzerklärung dieser Webseite unter „Cookie-Einstellungen“ jederzeit widerrufen werden.
Datenschutzerklärung
Impressum
Methodenentwicklung an humanen Zellkulturen für toxikologische Untersuchungen
Projekt
Förderkennzeichen: BfR-CPS-08-7Z-004
Laufzeit: 01.02.2007
- 31.12.2009
Forschungszweck: Angewandte Forschung
Komplexe Substanzgemische, die von verbrauchernahen Produkten auf die Haut migrieren, können in humanen Zellkulturen (primäre Keratinozyten, dentritische Zellen) auf ihr toxi-sches und sensibilisierendes Potential geprüft werden. Hierzu sind die Methoden zur Stan-dardisierung der Referenzparameter (z.B. Proteingehalt pro Kultur) sowie die simultane Messung verschiedener biochemischer/toxikologischer Parameter weiter zu entwickeln.
1) Umstellung der humanen Keratinozytenzelllinie HaCaT auf serumfreie Kulturbedingungen in Panserin-haltigem Kulturmedium zur Untersuchung der Zytokin-Expression. Zellkulturen mit normalem oder reduziertem Serumgehalt wurden mit serumfrei kultivierten Zellen verglichen. Die Morphologie der Zellen wurde mikroskopisch geprüft (Auftreten von Vakuolen als Zeichen von Mangelbedingungen). Zellen mit normaler Morphologie wurden eingefroren oder für toxi-kologische Experimente eingesetzt. 2) Etablierung einer Proteinbestimmungsmethode (BCA-Assay) für adhärente Zellen (HaCaT, V79) auf 96-well-Platten sowie Vorarbeiten für die Proteinbestimmung von nicht adhärenten Zellen (THP1) im Rahmen der laufenden Zellkulturarbeiten. HaCaT-Zellen wurden in Lysepuf-fer aufgeschlossen und der Proteingehalt von unterschiedlich dicht ausgesäten Zellen/Platte erfolgreich bestimmt. Für die notwendige Abtrennung des Kulturmediums bei THP-1-Zellen wurde ein Zentrifugenschlitten bestellt. Die Ergebnisse sollen in Verfahrensanweisungen umgesetzt werden und als Voraussetzung für die weitere Bearbeitung von Forschungsprojekten zur toxikologischen Untersuchung von Sub-stanzgemischen und Migraten aus Bedarfsgegenständen mit humanen Keratinozyten und dendritischen Zellen dienen.
Abschnittsübersicht
Fachgebiete
- Biotechnologie
- Toxikologie
Rahmenprogramm
Förderprogramm
Ausführende Einrichtung
BfR - Abteilung 7: Chemikalien- und Produktsicherheit (BfR - CPS)
