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Aus dem Reservoir: Identifizierung und Charakterisierung viraler und wirtsspezifischer Faktoren zoonotischer Kuhpockenviren (SPP1596 - Pox II)
Projekt
Förderkennzeichen: FLI-IVD-08-Ri-0466
Laufzeit: 01.06.2016
- 31.12.2019
Forschungszweck: Experimentelle Forschung
Stichworte: Tierseuchendiagnostik, Virologie
Kuhpocken (Cowpox-Virus = CPXV), ein Mitglied der Gattung Orthopoxvirus (OPV), hat ein sehr breites Wirtsspektrum einschließlich Nagetieren, Katzen, Rindern, aber auch mehrere Zootieren und dem Menschen. Das pathogene Potential verschiedener CPXV-Stämme ist eher variabel. Ein kürzlich beschriebenes CPXV-Isolat aus Ratten und menschlichen Infektionen in Süddeutschland, Bay09, verursacht eine schwere Erkrankung bei Wistar-Laborratten mit typischen Pockenvirus-Läsionen. Auf der anderen Seite führt die Infektion von Ratten mit dem CPXV-Stamm Brighton (BR) nur zu milden klinischen Symptomen. Die Kenntnis der Virulenzfaktoren von CPXV-Feldstämmen ist dabei entscheidend, um eine Risikobewertung für die bei Nagetieren und Katzen zirkulierenden Viren zu ermöglichen. Ein Vergleich aller verfügbaren CPXV - Sequenzen zeigt, dass es kein offensichtliches Virulenzmuster von viralen Genomsequenzen oder einen individuellen ORF gibt, der direkt mit dem Pathotyp der Isolate korreliert. Wir planen, einzelne rekombinanten Viren mit Deletionen von Kandidatengenen in BAC-abgeleiteten Bay09-Mutanten zu testen, 3D-Hautkulturen zu untersuchen und diese Viren im Wistar-Ratten-Modell zu charakterisieren. Der Einfluss einzelner mutierter Viren auf die Zellzyklusprogression wird in nicht permanent kultivierten Zellen getestet. Auch die immunhistologische Färbung von Hautläsionen in organotypischen Hautkulturen, im Rattenmodell und mittels Infektion der Chorioallantoismembranen (CAMs) wird eingesetzt, um diese Frage zu beantworten. Das übergeordnete Ziel dieser Studfien ist die Identifizierung neuer Virulenzmarker von Orthopockenviren im ursprünglichen Nagetierwirt, um ein prospektives Screening von neu isolierten CPXV zu ermöglichen.
- Chimären wurden konstruiert und charakterisiert - CPXV aus dem Reservoirwirt isoliert und in vitro und in vivo charakterisiert - Neue CPXV-Stämme komplett sequenziert und phylogenetisch analysiert - Weitere Versuche im Rötelmausmodel 12 Publikationen und 3 Abschlussarbeiten sind erschienen
Abschnittsübersicht
Fachgebiete
- Tiergesundheit
- Biotechnologie
