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Organisation eines Ringversuchs zur Authentifizierung von Pflanzenproben mittels DNA-Barcoding

Projekt

Ernährung und Verbraucherschutz

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Ernährung und Verbraucherschutz


Förderkennzeichen: MRI-NRZ-08-2021-63
Laufzeit: 01.07.2021 - 31.03.2022
Forschungszweck: Experimentelle Forschung

Im Rahmen  der § 64 LFGB AG „Molekularbiologische Methoden zur Pflanzen- und  Tierartendifferenzierung“ soll ein Ringversuch zur Authentifizierung von Pflanzenproben mittels DNA-Barcoding durchgeführt werden. Das NRZ-Authent  übernimmt in Zusammenarbeit mit CVUA Freiburg die Organisation des Ringversuchs, wird am Ringversuch selbst teilnehmen und  anschließend die Auswertung des Ringversuchs durchführen. Insgesamt sollen im Ringversuch die Barcode-Sequenzen für sechs verschiedene genetische  Marker bei fünf verschiedenen Pflanzenarten durch eine  Polymerase-Kettenreaktion (PCR) mit anschließender Sanger-Sequenzierung  bestimmt werden. Die ermittelten DNA-Sequenzen werden mit den Sequenzen in  der öffentlichen Nukleotid-Datenbank GenBank und bei zwei Markern zusätzlich  in der Barcode of Life Data (BOLD)-Datenbank abgeglichen, um die Spezies der  Pflanzenproben zu ermitteln. Ziel des Ringversuchs ist schließlich die  Verabschiedung einer Versuchsvorschrift für die Amtliche Sammlung von  Untersuchungsverfahren nach § 64 LFGB. Zunächst  wird das NRZ-Authent Vorversuche durchführen, um die Eignung eines der ausgewählten genetischen Marker (ITS1) zu überprüfen, für den bisher in der Unterarbeitsgruppe Pflanzen-Barcoding keine experimentellen Daten ermittelt wurden. Gleichzeitig wird das NRZ-Authent einen Entwurf der Versuchsvorschrift sowie eine Anleitung für die Teilnahme am Ringversuch  erstellen. An der  Beschaffung der Pflanzenproben, der DNA-Extraktion sowie der Kodierung der  Ringversuchsproben ist das NRZ-Authent nicht beteiligt. Die Auswertung des Ringversuchs geschieht in enger Absprache mit den Mitgliedern  der UAG Pflanzen-Barcoding und umfasst einerseits den Vergleich der Ergebnisse der von den Teilnehmerinnen und Teilnehmern ermittelten Datenbank-Abfragen und zusätzlich die Generierung von Konsensus-Sequenzen der einzelnen genetischen Marker sowie deren abschließende Auswertung durch Datenbank-Abfragen in GenBank und BOLD. Das Projekt gehört zur Daueraufgabe Unterstützung der amtlichen Überwachung bei der Methodenvalidierung ggf. für die  Übernahme in die ASU nach § 64 LGFB innerhalb des Themenfeldes Tier-/Pflanzenarten  (ggf. Rassen & Sorten) unter dem Aufgabenfeld Analytische Methoden für die Lebensmittel-Authentizitätskontrolle.

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